○ 연구결과
▶ 꿀의 주요단백질과 같은 분자량을 갖는 인공 단백질을 대장균 내에서 발현하였으며 분자량이 동일함을 확인 함.
▶ 꿀단백질에 대한 항체의 제작을 위한 토종꿀과 양봉꿀 주요단백질의 정제하여 Rat으로부터 다클론 항체를 제작하고 정제한 항체의 토종꿀과 양봉꿀의 단백질간의 선택성 조사를 완료함.
▶ 마커단백질의 대장균내 대량 발현시키고 마커단백질의 대장균을 이용한 대량생산 및 정제 모델을 정립함.
▶ 인공 마커단백질을 이용하여 시판 꿀의SDS-PAGE 판별법을 실증함.
▶ 본 연구에서 개발된 방법을 이용하여 시판 꿀 46종에 대해 검증하므로서 판별 기술의 정확성을 실증함.

목차

제출문 ... 1
요약문 ... 2
Summary ... 5
CONTENTS ... 8
목차 ... 10
제1장 연구개발과제의개요 ... 12
제2장 국내외 기술개발 현황 ... 13
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 16
제1절 연구개발 수행 내용 ... 16
1. 최종 연구 개발 사업 목표 ... 16
2. 년차별 연구 개발 사업 목표와 내용 ... 16
3. 연구개발 방법 및 설계 ... 19
제2절 연구개발 수행 결과 ... 21
1. 접근방법 ... 21
2. 재료 및 방법 ... 23
가. 인공 마커 단백질을 이용한 토종꿀의 판별법 ... 23
1) 재료 ... 23
2) pGEX vector를 이용한 인공 마커 단백질의 제작 ... 23
3) pHCE vector를 이용한 인공 마커 단백질 제작 ... 26
4) 재조합 마커 단백질의 정제 ... 26
나. 토종꿀의 면역학적 판별법 ... 27
1) 재료 ... 27
2) 꿀의 주요단백질의 정제 ... 27
3) 항체의 생산 ... 27
4) Western blot analysis ... 29
5) Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)법을 통한 시판꿀의 판별 ... 29
3. 결과 및 고찰 ... 31
가. 인공 마커 단백질을 이용한 토종꿀 판별법 ... 31
1) pGEX vector를 이용한 인공 마커 단백질의 제작 ... 31
2) pHCE vector를 이용한 인공 마커 단백질의 발현 ... 37
3) 재조합 마커 단백질의 가용화 및 정제 ... 41
4) 정제된 마커 단백질을 이용한 시판꿀 판별 ... 46
나. 토종꿀의 면역학적 판별법 ... 48
1) 꿀의 주요 단백질의 정제 ... 48
2) 항체 생산 및 정제 ... 54
3) Western blot analysis ... 58
4) ELISA법을 통한 시판꿀의 판별 ... 58
5) 두 가지 판별법을 이용한 꿀의 혼합여부 판별 ... 62
다. 두 판별법을 이용한 실증 ... 67
4. 결론 ... 71
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 73
제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 75
제6장 참고문헌 ... 76
끝페이지 ... 79